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    流式細胞儀操作步驟
    來源:凱瑞力楓  發布時間: 2013-11-20 06:09

    本流式細胞儀的各通道所對應熒光染色/料如下

    9.jpg

     

    一. 流式細胞儀軟件操作步驟

    下述描述僅限于軟件操作的記錄操作

    1. 開機(按流式細胞儀機房操作指南操作);

    2. 打開 CellQuest Pro (流氏細胞儀操作)軟件

    依據快捷菜單的指示,畫出數個門( “黑”圖 (一般至少是3個),即數據顯示與記錄圖。

    3. 選用菜單Acquire 下拉菜單中的connect (使計算機與流式儀相連)

    4. 設定數據存貯位置

    選用菜單Brown Untitle下拉菜單下的 Data,尋找適宜位置,建立文件夾

    注意下拉菜單下的第二項選擇

     1.jpg

    應用New鍵和 Choose鍵(以確定所得數據的存儲位置)

       在存貯時,點擊Brower, 在對話框中有兩個 Change按鈕

                               第二個Change按鈕用于改變每個數據存儲時的文件名字依

    5. 應用apple +數字鍵1、2、3、4出現4個對話框 (用于設計儀器記錄時的記錄條件),

          Detector, Threshold, Compensation and Status 

          上述四項在做雙重 ~ 四重染色時要用到(見下文)。

    6. 設定通道名字

    在所畫“黑”圖的通道的名字上直接點擊, 隨之更改通道的名稱(據你的實驗而定)

      如: CD4,Fox3, CD 121NK1.1等。

    7. 設定、修改和限定門 Gate

        利用所畫“黑”圖之左邊的快捷鍵,畫出幾個門,如:門R1, R2R3等以設定門Gate

        在菜單Gate下拉菜單下,設定 (在如下的對話框中進行設定) 修改和限定門的范圍

    8.jpg

    設定的參數是根據我們每個人的具體實驗而定,and 是同時滿足的意思。據此,限定了了所記錄細胞的種類。

    8. 請熟悉所畫的“黑”圖之左邊的快捷鍵

         請找到畫陽性與陰性區域的 “十字線”快捷鍵 

    9. 設定記錄模式(根據你的需要,也可以應用同一模式設定分析模式)

          找到Inspector,得到如下的對話框              

                   3.jpg 

    10.設定補償等

     Detector對話框中的Mode項的選擇

                          4.jpg

    11. 設定所記錄細胞數目

    Acquisition & Storage 下拉菜單中尋找,

                      5.jpg

    12. 實時顯示所記錄細胞數

    Acquisition & Storage 下拉菜單中尋找

           7.jpg

    13.  如何記錄?  選用菜單Aquiresition Control命令進行記錄,出現下述對話框

                              6.jpg 

       Setup激活時:進行儀器狀態的調試(此時對照組的細胞流經探測管);

    換言之,此時不進行數據的記錄。

        Acquire激活:進行數據的記錄(此時實驗組的細胞流經探測管);

            數據記錄完后,要應用同一對話框中的Save鍵進行數據儲存。

     20. 關機(使電腦與流式儀分開):

    在最左側的菜單中,找到下拉菜單,尋找logout

    21. 關機后按照流式細胞儀室的指南操作進行

     

    注意:加壓閥鈕(工作狀態時它應對向你,關機后的反向與你)

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